确定钙如何影响A549细胞的外泌体分泌

外泌体已被确定为早期检测的可能标记物，也是干预癌症等疾病的有前途的研究途径. 它们被认为是癌症扩散到全身的一种可能方式. 探讨Ca2+(钙)对A549细胞外泌体分泌的影响，有助于了解外泌体的整体特性, 它们如何可能用于癌症等疾病的传播，以及外泌体的分泌是否可以被操纵. 本实验旨在发现Ca2+水平对外泌体分泌的影响，以及外泌体分泌的增加是否与浓度的增加成正比. 我假设钙离子的含量增加了, 高于典型的细胞质水平, 会增加融合事件的数量，从而增加样品中外泌体的总量吗.

为了检验假设, 用荧光标记转染A549细胞，并在显微镜板上引入不同水平的钙. 使用全内反射(TIRF)显微镜, 监测标记的CD63蛋白, 哪些参与了核聚变, 并采集每个细胞的多个视频，记录每个样品的融合总事件. 在我的实验中，核聚变增加了，但并不明显. 测试图像大概只有一个, 偶尔两个, 与仅用Ca2+处理的对照图像相比，融合事件更多. 因此，可能需要改变实验模型以增加核聚变. 一种可能的变化可能是离子霉素的用量或它与Ca2+一起被引入溶液的方式.